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免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)操作步驟
免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)操作步驟
更新時(shí)間:2021-01-19
訪問(wèn)量: 3608
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家

服務(wù)名稱:免疫熒光染色操作步驟
規(guī)格:切片
價(jià)格:80
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢?cè)斦劊覀儠?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
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免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)操作步驟產(chǎn)品概述:

免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

 

 

制片

選無(wú)自發(fā)性熒光的石英玻片或普通優(yōu)質(zhì)玻片,洗凈后浸泡于無(wú)水乙醇和乙氧基乙烷等量混合液中。用時(shí)取出用綢布擦凈。將待檢樣品如組織塊剪成適當(dāng)大小印壓于玻片上。也可采用冰凍切片或石蠟切片樣品。

 

二、固定

除研究細(xì)胞表面抗原或不穩(wěn)定抗原可不固定外,--般均應(yīng)固定。

固定的作用有三:

1.防止標(biāo)本從玻片上脫落。

2.除去防礙抗原抗體結(jié)合的類脂,使抗原抗體結(jié)合物易于獲得良好的染色結(jié)果。

3.固定的標(biāo)本易于保存,如組織切片固定后在-20%C下可保存一年而不改變其染色特性。

標(biāo)本的固定原則是:

1.不能損傷細(xì)胞內(nèi)的抗原。

2.不能凝集蛋白質(zhì)。

3.不能損傷細(xì)胞形態(tài)。

4.固定后應(yīng)保持細(xì)胞膜的通透性,以允許抗體進(jìn)入與抗原結(jié)合。

 

三、水洗

固定后以冷的0.01 Mol/L pH7 4PBS液浸泡沖洗,后以蒸餾水沖洗,防止自發(fā)性熒光。

 

四、染色

染色分直接染色法與間接染色法。

1.材料與試劑

(1)熒光抗體,稀釋至應(yīng)用濃度。

(2) 0.01 Mol/L pH7 .4PBS液

(3) 9份優(yōu)質(zhì)甘油加1份pH7 .4PBS液即為甘油緩沖液。甘油有減少非特異性熒光的作用。

(4)帶蓋方盤(pán)

2. 直接染色法

(1)將固定好的玻片置于濕盤(pán)中,滴加熒光抗體染色液,以覆蓋為度,加蓋,37°C感做30min~45min.

(2) PBS沖洗3次,每次沖洗3 min,即3x3沖洗。

(3)蒸餾水沖洗。

(4)滴甘油緩沖液一滴,封片,熒光顯微鏡檢查。

 

3.間接染色法

(1) 檢查抗原:

①取固定標(biāo)本,加已知的免疫血清,37°C孵育30 min。

②以PBS液3x3沖洗。

③再加熒光標(biāo)記的抗抗體,37°C孵育30 min。

④PBS 3x3沖洗。

⑤H2O沖洗,涼干。

⑥加甘油緩沖液,封片、鏡檢。

(2)檢查抗體:

①兔疫后動(dòng)物的淋巴組織涂片,自然干燥,甲醇固定。

②滴加相應(yīng)抗原液(按1: 100~1: 500稀釋), 37°C孵育30 min.

③PBS液3x3沖洗。

④加熒光抗體,37°C孵育30 min.

⑤PBS液3x3沖洗。

⑥水洗,干。

⑦加甘油緩沖液,封片、鏡檢。

 

[項(xiàng)目開(kāi)展范圍]慢病毒,腺病毒,RNAI類, 分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn),芯片類實(shí)驗(yàn),并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計(jì)指導(dǎo)、基金申請(qǐng)指導(dǎo)、SCI. 核心期刊等服務(wù)。

 

 

 實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

 

免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

 

透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)代做

酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù)

雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

喹諾酮類快速檢測(cè)試劑盒

組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)

 

染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

 

多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實(shí)驗(yàn)

免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù)

ATP/ADP檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)

蛋白相互作用分析

堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

PKC活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn)

(Label-free)

 

DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

端粒酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

掃描電鏡服務(wù)

NF-KB p65活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

 

慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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