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CBA流式多因子的工作原理介紹
點擊次數(shù)：1370 更新時間：2022-09-27
CBA，即微量樣本多指標(biāo)流式蛋白定量技術(shù)是一個基于流式細(xì)胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法，它能夠同時對單個樣品中的多個指標(biāo)進(jìn)行檢測。
通過利用一系列帶有熒光標(biāo)記的微小、分散的微球連接特定的捕獲抗體以捕捉溶液系統(tǒng)中的待測物，通過對應(yīng)各種不同檢測物的特異微球上所帶有熒光強度不同從而同時測定分析樣本中多種可溶性成分的數(shù)量。
CBA流式多因子包被細(xì)胞因子特異性抗體的熒光磁性微球與待測樣本孵育，可與樣本中相應(yīng)的細(xì)胞因子特異性結(jié)合，加入生物素標(biāo)記的檢測抗體后，形成抗體包被微球-細(xì)胞因子-檢測抗體的免疫復(fù)合物；最后加入SAV-PE，通過流式細(xì)胞儀檢測，熒光強度與樣本中細(xì)胞因子的含量成正比，最后結(jié)合細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而實現(xiàn)對同一份樣本中細(xì)胞因子的定量檢測。
細(xì)胞因子在體內(nèi)具有重要的病理作用，在感染、炎癥、自身免疫病、免疫缺陷疾病等狀態(tài)下，部分細(xì)胞因子會明顯變化，根據(jù)這些指標(biāo)可以判斷機體的免疫功能。血清、血漿或組織液中細(xì)胞因子檢測可以對疾病診斷和治療做出相應(yīng)評價,具有重要的應(yīng)用價值。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)以及腫瘤學(xué)等領(lǐng)域的流式細(xì)胞術(shù)是細(xì)胞因子檢測的一種方法。
由于血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清、積液中的細(xì)胞因子含量低，不容易檢測，加上樣本數(shù)量少，傳統(tǒng)的方法無法滿足多因子檢測。流式微球捕獲芯片技術(shù)（CBA）微量樣本多重蛋白定量技術(shù)，是用流式細(xì)胞儀對多重蛋白進(jìn)行定量檢測的方法，能夠同時對樣本中的多個指標(biāo)進(jìn)行定性、定量檢測，可用于細(xì)胞因子檢測。
流式細(xì)胞儀技術(shù)（FCM）技術(shù)可以應(yīng)用流式細(xì)胞儀，結(jié)合單克隆抗體技術(shù)、免疫熒光染色技術(shù)，對快速流動液體中的單細(xì)胞進(jìn)行多種參數(shù)測量和分析。CBA檢測系統(tǒng)采用聚苯乙烯熒光微球連結(jié)特定的捕獲抗體，捕捉待測物，同時再加入待測物的熒光抗體，三者形成夾心復(fù)合物，通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。流式細(xì)胞術(shù)的優(yōu)點是同時可以進(jìn)行多參數(shù)檢測，快速并且信息量大。
